利用中美冠科数据库,快速查找所需模型
OncoExpress|HuBase|XenoBase|MuBase

博客

AACR 2018小鼠同种异体移植肿瘤模型

2018-05-15

  •  
  •  
  •  

我们在2018年AACR上展示了许多免疫肿瘤学模型相关数据,13张海报中有3张海报关于我们的新型小鼠同种异体移植肿瘤模型。近期,我们在审查KPC PDAC模型开发的新数据,这是对模型进行QC的新平台,也可以用于免疫分型以更好地了解模型响应的变化。

2018年AACR 1144海报:建立Kras (G12D)/Trp53 null/Pdx1-cre (KPC)小鼠同种移植肿瘤模型,用于联合免疫治疗的药效评估

研发胰腺导管腺癌(PDAC)的有效治疗是当前的需求。PDAC有5年很低的生存率,能选择的治疗标准也很少,患者对较新的抗PD-1和CTLA-4免疫疗法单药产生耐药性。研究人员正在尝试将化疗、小分子免疫调节剂和免疫检查点抗体联合用于治疗这种癌症,从而推动对相关免疫活性模型的需求。

KPC模型(Kras(G12D)/ Trp53 null / Pdx1-cre)是一个很好的开始,因为它们在形态学、免疫微环境和缺乏治疗反应等方面能够重现人类疾病。然而,由于肿瘤发展的自发性,亲本模型很难用于药理学研究,并且传代成本昂贵。

小鼠同种移植肿瘤模型可以克服这些问题。他们将自发性肿瘤从GEMM /致癌物诱导的模型直接移植到免疫完全小鼠中,提供了PDX模型的鼠类。 我们现在开发了KPC鼠同种移植肿瘤模型,该海报详细描述和验证了用于组合免疫疗法评估的模型。

KPC小鼠同种移植肿瘤模型验证和免疫学概述

我们验证了大量模型特征,首先确认皮下和原位KPC同种移植模型的组织病理学与原发性疾病和小鼠PDAC肿瘤是否类似,然后分析皮下和原位肿瘤。

这种免疫分型表明两种模型具有相似的免疫环境,具有高水平的巨噬细胞和低水平的效应性CD4 +和CD8 + T细胞。(也显示出M1-M2巨噬细胞极化)。

分析还显示同种移植肿瘤模型表达低水平的PD-L1,这解释了该模型对抗PD-L1治疗的不良反应。免疫分型后处理类似于媒介治疗的肿瘤(和治疗前的肿瘤)缺乏应答。KPC模型还可以用于评估治疗标准,同时皮下和原位模型对gemcitabine有抗药性。

所有这些因素都意味着,KPC同种异体移植重现了原发疾病对一系列治疗的反应不足,为评估免疫治疗/联合免疫治疗提供了非常合适的模型。

我们的海报数据进一步证明了原位同种移植模型对新型免疫疗法的应答,并增加了存活率。

小鼠同种移植肿瘤模型的可用性,其突变负荷比同基因模型更接近人类疾病。

海报还提供了整个小鼠同种异体肿瘤移植平台的概况、可用模型以及与同基因型的变异负荷比较;小鼠同种异体移植模型具有较低的突变负荷,提供了与人类疾病更接近的小鼠肿瘤模型平台。

2018年AACR 5116海报:小鼠肿瘤同种异体移植模型的发展及其遗传指纹识别,以确保使用这些模型进行质量控制的I / O研究

随着小鼠同种异体肿瘤移植系统在免疫肿瘤研究中的应用越来越多,为了确保正确的模型证明,对肿瘤进行跟踪和检测是十分重要的。由于小鼠肿瘤来源于有限的近亲繁殖实验,并且缺乏快速且简单测定的标记,所以不像人源肿瘤(其中遗传ID可以通过短串联重复基因分型或HLA分型容易追踪)那样容易。

在这张海报中,我们详细介绍了在小鼠肿瘤模型系统(包括同种异体移植和同基因模型)中建立新型、高效的模型质量控制和肿瘤ID方法。该测定基于肿瘤模型的遗传分析以确定可以检测到的独特基因组特征(例如基因融合)作为鼠肿瘤模型ID的指纹。

实验流程:

  1. 将原始细胞系或小鼠肿瘤进行RNAseq,以确定独特的遗传特征(基因融合)
  2. 然后用RT-PCR和Sanger测序来验证在0段肿瘤中有相同基因融合
  3. 随后测试样本,发现同样的融合
  4. 这说明融合没有消失,是肿瘤的一个稳定特征,可以作为标志

我们验证了小鼠同种异体移植模型和两个同基因模型中的基因融合方法,证实了该方法是一种稳定的QC技术,并且独特的遗传特征可以作为小鼠模型ID和质量控制的遗传指纹。

2018年AACR 4059海报:疫苗接种引起小鼠乳腺癌同种移植模型中肿瘤浸润细胞亚型明显转变

通过在异种移植肿瘤模型上进行研究,得出作用机制。在2016年AACR展会上,我们提供了有关mBR6004乳腺癌同种异体移植模型的数据。该模型通过由MMTV-PyVT转基因小鼠自发性形成的乳腺癌原位植入到FVB / N小鼠中得到。该模型和原始GEMM肿瘤具有相似的生长,转移和组织病理学,并且对CTLA-4有响应,但对PD-1 / PD-L1抑制剂没有反应。

我们在2016年AACR展览的海报显示,疫苗接种使得肿瘤对PD-1 / PD-L1阻断有反应,表明宿主免疫激活会影响对检查点抑制剂的反应。我们在2018年的海报进一步研究这些数据以揭示此反应机制。

从FoxP3lo 向 FoxP3hi转变

这篇海报简要介绍了小鼠同种异体肿瘤移植模型如何开发、使用的免疫表型标记以及揭示肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)表型的背后的控制机制,揭示了这种新反应背后的机制。

FACS数据显示,在预先接种疫苗的肿瘤中,TIL-Treg从FoxP3lo向FoxP3hi群体急剧转变,这可能与之前发表的简单的FoxP3lo Treg和FoxP3hi效应Treg(eTreg)相对应。长期以来,FoxP3一直被认为是Treg的关键标志,最近的研究表明Treg与不同水平的FoxP3和相关功能变异有显著的差异性。这表明了TIL在癌症预后和对免疫肿瘤药剂敏感性方面的相互冲突作用。

我们的海报表明,TIL-eTreg和Treg不同,可能在检查点抑制剂治疗的肿瘤反应中起关键作用。 这可能意味着通过事先接种疫苗以改变TIL-eTreg状态可能成为加强检查点抑制剂治疗的重要方案。

点击此处查看更多2018年AACR相关资讯,包括PDX,鼠源同种移植模型,离体及体外实验以及微生物研究等。

Topics: Oncology

关注微信公众号