开发短期免疫疗法评估研究所用的外周血单核细胞(PBMC) 人源化肿瘤模型。
人源化模型的需求
免疫肿瘤学仍是癌症研究的主流，对开发新型和改进型模型以应用于临床前试验的需求日益增长。在评估人类特异性药剂疗效时，需要使用具有人类免疫系统的临床前模型。
外周血单核细胞(PBMC) 人源化肿瘤模型，对短期试验尤为明显适用。
何为外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型？
外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型，将人外周血单核细胞(PBMC)系统与细胞系异种移植相结合，产生局部重组人类免疫系统的人源化肿瘤小鼠模型。
外周血单核细胞(PBMC) 人源化肿瘤模型可取代价格昂贵的全造血干细胞(HSC)重组模型，全造血干细胞(HSC)重组模型也可植入人源肿瘤。
如何构建外周血单核细胞(PBMC) 人源化肿瘤模型？
以免疫缺陷小鼠品系为起点，如NOG ®、NOD/SCID或NCG。小鼠品系不一样，对外周血单核细胞(PBMC)的接受性程度也不一样，多了解一些这方面的知识有助于我们为构建外周血单核细胞(PBMC) 人源化肿瘤模型选择合适的动物品系。
外周血单核细胞(PBMC)系指有圆形细胞核的血细胞，包括淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞。理想情况下，用于人源化的新鲜外周血单核细胞(PBMC)多来自医院，因而可以进行患者相关性的分析。由于人类供体之间存在固有差异性，每次造模/接种至少要采用2个不同的外周血单核细胞(PBMC)供体。
或者，从市场购买外周血单核细胞(PBMC)，这样就降低了差异性，可以仍旧采用同一个外周血单核细胞(PBMC)源进行重复研究。
建立外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型需要进行优化。探索肿瘤细胞和外周血单核细胞(PBMC)浓度的最佳比例，使肿瘤在免疫系统反应开始之前可充分生长。
另外，人源化肿瘤模型优化还包括为每个外周血单核细胞(PBMC)和肿瘤的组合寻找最佳的PBMC和肿瘤接种方法。人外周血单核细胞(PBMC)可与所选异种移植肿瘤细胞混合，亦可顺序植入免疫缺陷小鼠体内。外周血单核细胞(PBMC)植入途径包括i.v.或i.p.，或者在与肿瘤细胞混合接种时使用s.c.。
所有这些都会导致，在逐个模型甚至逐项研究基础上，最佳肿瘤移植与最佳免疫细胞重组相匹配。最终模型得到充分优化，在局部重组人类免疫功能的动物体内，接种人源化肿瘤，为在体内试验人类特异性免疫疗法做好充分准备。
哪些免疫细胞群被重组？
综上所述，这些模型提供了局部人源化免疫系统重组，到底是什么样子的呢？
通过流式细胞术(FACS)分析血液和肿瘤样品，发现T和NK细胞群重组。虽然B细胞也可重组，但未必能在外周血中检测到，因为B细胞比T细胞和NK细胞清除得快。
在某些情况下，由于敏化和激发作用，可以看到B细胞抗原反应和抗体形成。
会出现哪些癌症适应症？
由于在这类模型存在移植物抗宿主病(GvHD)反应，从而限制了对异种移植物肿瘤模型的选择（下文将详细讨论）。这意味着需要选用仅需较短时间即可生长的肿瘤模型。因而，传统细胞系源异种移植得到广泛应用。
人源肿瘤细胞系现已得到广泛应用，为多种癌症类型建立了外周血单核细胞(PBMC)-人源化肿瘤模型，包括乳腺癌、结肠癌、食道癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌和舌癌、白血病、淋巴瘤和黑色素瘤。
肿瘤接种方法通常还是采用皮下接种，但也有部分原位转接模型。如果所需的异种移植模型尚未开发，可以根据您研究的需求进行定制。
外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型的优点和用途？
尽管外周血单核细胞(PBMC)人源化模型非常复杂，但与造血干细胞(HSC) 人源化系统相比，仍然更快捷，也更简单，即利用人外周血单核细胞(huPBMC)肿瘤模型研究更具成本效益。
这些模型对于短期研究或高通量的研究尤为高效。在进入完全人源化研究之前，外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型对初始药剂筛选、层理或概念验证性(POC)确认也大有利用价值。
目前已有一系列实体肿瘤和血癌模型，经过优化，这些模型通常以免疫检查点抑制剂等常见免疫肿瘤学药剂为基准。
哪种药剂评估可以应用外周血单核细胞(PBMC)人源化模型？
外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型可用于评估靶向T和NK细胞的药剂，包括免疫检查点抑制剂和激动剂，T细胞调节剂及双特异性T细胞抗体，以及NK调节剂和诱导ADCC的制剂。也可评估靶向B细胞的癌症疫苗。
何为外周血单核细胞(PBMC)人源化模型的挑战？
外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型的确具有挑战性，尽管这些挑战可被解决和攻克。
如上所述，因为个体外周血单核细胞(PBMC)有个性化反应或缺乏反应，利用新鲜的外周血单核细胞(PBMC)时，差异性可谓是固有问题。每次研究，至少要使用2个外周血单核细胞(PBMC)供体，并用不同供体对重复研究，这一难题即可克服。
如果利用医用外周血单核细胞(PBMC)，重复供应可能是个问题——PBMC供体可能无法为重复或新研究再次提供PBMC。商业采购可为变通方案，这样可再次使用相同的供体。商用外周血单核细胞(PBMC)通常采取冻存供应的方式，但是模型验证表明，冻存的外周血单核细胞(PBMC)也可进行免疫细胞重组，且与新鲜外周血单核细胞(PBMC)相当。
利用这类模型还有一个难题：发生移植物抗宿主病(GvHD)反应。这是由人类供体源免疫细胞对小鼠抗原产生反应而引发，约在人外周血单核细胞(PBMC)接种后3周左右的时间内出现。这样就导致治疗时间窗很短——仅允许10天 – 3周来完成一项药效研究。
在开始利用这类模型研究之前，应该考虑移植物抗宿主病(GvHD)反应，其在这类研究中发挥着一定作用。这意味着对于短期概念验证性(POC)研究来说，外周血单核细胞(PBMC)人源化肿瘤模型较为理想，但并不适于长期研究，如记忆反应试验或肿瘤生长缓慢的试验。
目前正在评估是否能克服移植物抗宿主病(GvHD)反应来改进模型，例如，据报道，主要组织相容性(MHC)I类和II类缺陷小鼠可延缓移植物抗宿主病(GvHD)的反应。因此，这些小鼠用作模型基础，可扩大治疗窗口。
结论
从完全人源化、特异性靶点人源化至局部重组外周血单核细胞(PBMC) 人源化模型，有多种模型可应用于人类特异性药剂试验。如果需要寻找供快速概念验证性(POC)研究和初始试验研究的模型，那么外周血单核细胞(PBMC) 人源化模型可称得上是最佳选择。
