我们近期在「使用稳定/暂时性人员肿瘤免疫模型」的文章探讨了评估疗效所需要的工具，但其中有个问题是捐赠者数量有限，因此研发出了一种独特、嵌合、的人源化药物标靶模型。
克服人源化模型之间的差异性
人源化模型能够显示出不同的治疗反应。在一个稳定的人源化老鼠模型中，我们能够看到捐赠者之间的差异，但若是一个研究需要重新开始，原始的捐赠者则无法再次使用。而一个暂时性的人源老鼠模型，能够透过使用最后两个不同的捐赠者的PBMC解决这个问题，但差异性还是有机会存在。
人源化药物标靶模型就是设计用来解决这样的问题，并提供在进入到临床实验前一个体内免疫疗法评估。
利用 CRISPR/Cas9 将人类药物标靶敲入
这个平台提供符合人类疗法的体内评估模型，例如检查点抑制剂。在每一个老鼠模型里，老鼠蛋白药物标靶如PD-1、CTLA-4、OX40皆被敲出，再将人类的部分敲入。
这都是透过 CRISPR/Cas9 技术达成的，并创造了一个有外显子 (PD-1 exon2) 或是受体基因变成 OX40 的嵌合模型。FACS分析法通常是用来确保人类蛋白有正常表达。
目前发展出双敲入模型用来测试人类联合疗法。另外还有单敲入模型，但只能用来测试人类抗PD-1抗体与标靶老鼠抗体的结合。
人源化配体模型
很明显的，不是每一种疗法都靶向受体，利用同样的科技也能够创造出配体的同源模型，例如人源化 PD-L1 的 MC38 模型。
人源化 PD-L1 配体异种移殖与 PD-1 受体老鼠模型可以结合，重新创造出一个完整人类配体/受体的复合体。PD-L1也可以用老鼠模型代替，结合肿瘤与老鼠来表达hPD-L1可以确保完整呈现肿瘤与宿主树突细胞。
药效测试与免疫组合模型
这类的模型主要是用来做药效测试，像是个别药剂与联合检查点抑制剂，提供临床前数据来协助拟定临床实验的计划。
下游的分析像是评估 TIL 也是很常见的，用来评估 CD3+T 细胞、CB8+ 细胞、或是自然杀手细胞在治疗后进入肿瘤与其他器官中的情形。
使用不同种类的模型
已经有许多模型可以用在检查点蛋白上，例如 PD-1、CTLA-4、OX40、CD137、TIM3、以及 PD-L1。另外还有正在研发的LAG3、GITR、CD40。
不只老鼠基因目前有检查点抑制剂，另外还有其他的人源化肿瘤免疫研究：
- Human FcγR receptor knock in enabled the study of FcγR function in vivo and assessment of therapeutic antibodies against this target
- Chimeric MHC-II transgenic mice were shown to mount a human DR-restricted immune response
- Mice with human MCH-I and TCR knock in were used to generate optimal-affinity T cell receptors for T cell therapy
若想获得更多关于如何使用这些模型的方法，请参考：Li et al Experimental animal modeling for immuno-oncology.
