在近期的3D体外药物开发网络研讨会上，Rajendra Kumari博士回答了有关HUB 类器官技术和肿瘤类器官模型的关键问题。
HUB类器官模型与开发
为什么成体干细胞会形成肿瘤类器官？
干细胞是未完全分化的细胞，具有自我更新能力以及再生各种组织和器官的潜力。HUB方法使用干细胞巢因子刺激这些干细胞增殖和分化，因此，随着分化细胞持续生长，不会产生干细胞富集。
是否可以建立模拟癌症干细胞的模型？
3D球状体通常用于癌症干细胞富集，而不是类器官，因为细胞能够分化。
您能否说说患者来源的球状体和患者来源的类器官之间的重要差异？
球状体是单细胞群的细胞簇或聚集体，或不同细胞的混合体，通常是永生化细胞系、原代细胞或人体组织的片段。类器官与此不同，它是由干细胞发育得到，并且通过自组织而形成了多个细胞系。类器官还具有3D形状和结构，类似于其起源组织的微观解剖结构。
球状体可以模拟不同的增殖和静止表型，以及药物渗透、耐药和缺氧，但不能长期培养并经历衰老。相反，类器官可在长期培养中维持。
您是否还建立了模仿正常组织的3D模型来研究药物副作用？
我们确实有来自HUB的“正常”类器官，目前正在扩展中。其他人使用HUB类器官进行毒性测试，而我们目前专注于临床前肿瘤学。
正常类器官是否与肿瘤器官相匹配？
是的，HUB已使用邻近肿瘤的正常组织产生了匹配对。
您拥有实体瘤来源的类器官，但没有白血病或淋巴瘤的类器官。您能解释一下原因吗？
目前，HUB培养类器官的方法仅对上皮来源细胞有效，因此我们没有淋巴瘤或白血病的类器官。我们可以将离体淋巴瘤PDX用于3D培养。
HUB类器官模型技术问题
如何对HUB类器官培养物进行传代？
我们接受了HUB的培训，获得了最佳传代方法的建议。我们无法明确共享此信息，但是有许多公开的方法和在线信息可用。
是否先分离类器官单细胞然后接种以进行药物筛选？
通过铺板成为类器官。
您是否在药物筛选期间每天更换培养基以替代生长因子？
不，类器官以一定密度铺板，以免耗尽培养物中的可用营养素——在测定中孵育5天。
您是否已在“成熟前”阶段，例如在多周扩展步骤之前，测试了PDO样3D细胞培养物？
我们首先要建立一个主细胞库，这在每个模型的传代方面会有所不同。一旦我们知道可以实现类器官生长并经过SNP验证，就可以对其进行表征。由此开发一个工作细胞库，并再次经过SNP验证，因此我们不会在任何早期阶段进行测试。
如果对我们的类器官平台和模型有任何其他疑问，请联系我们。
